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 γ-谷氨酰半胱氨酸銜接酶(GCL)
γ-谷氨酰半胱氨酸銜接酶(GCL)
品牌:原鑫生物
類別:代測服務 - LC-MS檢測|液相串聯質譜
規格:暫無
  預約待測

    γ-谷氨酰半胱氨酸銜接酶(GCL)

γ-谷氨酰半胱氨酸銜接酶(GCL)

    測定意義:

    GCL是GSH合成的限速酶,GSH對GCL有反應抑止作用。GCL基因表達受多種要素調理,如氧化劑、抗氧化劑、生長因子和炎癥因子等。GCL活性上下對GSH含量和GSH/GSSG比值有重要影響。

    測定原理:

    在ATP和Mg2+存在下,GCL催化谷氨酸和半胱氨酸合成γ-谷氨酰半胱氨酸;同時ATP去磷酸化產生無機磷分子,經過測定無機磷增加速率,即可計算出GCL活性。

    GCL測定操作

    1.分光光度計預熱30min,調理波長到660nm,蒸餾水調零。

    2.2.空白管:取1.5mLEp管,依次參加試劑一240μL、試劑二260μL、試劑三60μL和蒸餾水120μL,混勻后蓋緊,37℃水浴精確反響15min;再參加試劑四300μL,混勻后,25℃、8000g,離心10min,取上清500μL,參加試劑五500μL,混勻后蓋緊,45℃水浴10min,冷卻后測定660nm處吸光值,記為A空白管。

    3.3.測定管:取1.5mLEp管,依次參加試劑一240μL、試劑二260μL、試劑三60μL和上清液120μL,混勻后蓋緊,37℃水浴精確反響15min;再參加試劑四300μL,混勻后,25℃、8000g,離心10min,取上清500μL,參加試劑五500μL,混勻后蓋緊,45℃水浴10min,冷卻后測定660nm處吸光值,記為A測定管。




   

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